3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter MDA2CAM96, 96 tests, 1 ea Kullanma talimatları

Sayfa yükleniyor ...

166

3

Yayınlanma Tarihi: 2019-01

Ürün Talimatları

Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter

Ürün Tanımı ve Kullanım Amacı

3M™ Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter zenginleştirilmiş gıda ve çevresel gıda işleme numunelerinde

Campylobacter jejuni, Campylobacter lari ve Campylobacter coli’nin hızlı ve spesik tespiti için 3M™ Moleküler Tayin

Sistemi ile birlikte kullanılır.

3M Moleküler Tespit Analizi’nde, nükleik asit dizgelerinin yüksek özgüllük ve duyarlılıkla hızla ampliye edilmesi için döngü

aracılı izotermal amplikasyonun yanı sıra amplikasyonun tespit edilmesi amacıyla biyoluminesans kullanılır. Negatif

sonuçlar test tamamlandıktan sonra gösterilirken, olası pozitif sonuçlar gerçek zamanlı olarak bildirilir. Olası pozitif sonuçlar,

tercih edilen yöntem kullanılarak veya yerel düzenlemelerde belirtildiği şekilde doğrulanmalıdır

(1,2)

.

3M Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter ürünü, laboratuvar ortamında, laboratuvar teknikleri konusunda eğitim

almış profesyonellerin kullanımına yöneliktir. 3M, bu ürünü yiyecek veya içecek endüstrileri dışında kullanım için tescil

ettirmemiştir. Örneğin 3M bu ürünü farmasötik ürünler, kozmetik malzemeler, klinik veya veterinerlik amaçlı numunelerin

testlerinde kullanım için tescil ettirmemiştir. 3M Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter olası tüm gıda ürünleri, işlenmiş

gıdalar, test protokolleri veya mümkün olan tüm bakteri suşları ile değerlendirilmemiştir.

Tüm test yöntemlerinde olduğu gibi, zenginleştirme ortamının kaynağı, formülasyonu ve kalitesi sonuçları

etkileyebilir. Numune alma yöntemleri, test protokolleri, numune hazırlama, taşıma ve laboratuvar tekniği gibi faktörler

de sonuçları etkileyebilir. 3M, yöntemin kullanıcının ölçütlerini karşıladığından emin olmak için belirli gıdalar ve mikrobiyal

zorluklarla yeterli sayıda numune kullanılarak kullanıcının ortamında zenginleştirme ortamı dahil olmak üzere yöntemin

değerlendirilmesini önerir.

3M, 3M Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter’i 3M™ Campylobacter Zenginleştirme Besiyeri ve kansız Bolton

Zenginleştirme Besiyeri ile birlikte değerlendirmiştir.

3M™ Moleküler Tayin Cihazı, numune içinde var olan organizmaları yok etmek için tasarlanmış lizis test aşaması

sırasında ısıl işlemden geçen numuneler ile kullanım için tasarlanmıştır. Lizis test aşaması sırasında doğru şekilde ısıl

işleme tabi tutulmayan numuneler, olası bir biyolojik tehlike olarak düşünülebilir ve 3M Moleküler Tayin Cihazı’na

YERLEŞTİRİLMEMELİDİR.

3M Gıda Güvenliği, ISO (Uluslararası Standardizasyon Teşkilatı) 9001 tasarım ve üretim sertikasına sahiptir.

3M Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter test kiti, Tablo 1’de açıklanmış olduğu gibi 96 test içerir.

Tablo 1. 3M Moleküler Tespit Analizi Kit Bileşenleri

Malzeme Tanım Miktar İçindekiler Yorumlar

3M™ Lizis Solüsyonu (LS)

Şeaf tüplerde

pembesolüsyon

96 (8 tüplük 12 şerit)

Tüp başına

580 μL LS

Raı ve

kullanıma

hazır

3M™ Moleküler Tespit Analizi 2 -

Campylobacter Reaktif Tüpleri

Mor tüpler

96 (3 torba; 8 tüplük

4şerit içerir)

Liyolize spesik

amplikasyon ve

tespit karışımı

Kullanıma

hazır

İlave kapaklar Mor kapaklar 96 (8 kapaklık 12 şerit)

Kullanıma

hazır

3M™ Reaktif Kontrolü (RC)

Şeaf üstten

kapatmalıtüpler

16 (8 ayrı tüp içeren

2poşet)

Liyolize

kontrol DNA'sı,

amplikasyon ve

tespit karışımı

Kullanıma

hazır

Kitte sunulmayan Negatif Kontrol (NC), 3M Campylobacter Zenginleştirme Besiyeri gibi steril bir zenginleştirme ortamıdır.

NC olarak su kullanmayın.

Hızlı başlangıç kılavuzu şu adreste bulunabilir: www.3M.com/foodsafety

(Türkçe)

TR

167

Güvenlik

Kullanıcı, 3M Moleküler Tayin Sistemi ve 3M Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter ile ilgili talimatlarda yer alan tüm

güvenlik bilgilerini okumalı, anlamalı ve bunlara uymalıdır. Güvenlik talimatlarını ileride başvurmak üzere saklayın.

UYARI: Önlenmemesi halinde ölüm ya da ciddi yaralanma ve/veya mal zararı ile sonuçlanabilecek tehlikeli bir

durumu gösterir.

BİLDİRİM: Kaçınılmaması halinde maddi zarar ile sonuçlanabilen olası tehlikeli bir durumu gösterir.

W UYARI

3M Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter’i insanların veya hayvanların sağlık durumlarını tanılamak amacıyla

kullanmayın.

Kullanıcı, personelini doğru test teknikleri konusunda eğitmelidir; örneğin, İyi Laboratuvar Uygulamaları

(3)

,

ISO/IEC 17025

(4)

veya ISO 7218

(5)

.

Kontamine ürünün açığa çıkmasına yol açan yanlış bir negatif sonuçla ilişkili riskleri azaltmak için:

• Tam olarak ürün talimatlarında belirtildiği şekilde protokolü uygulayın ve testleri gerçekleştirin.

• 3M Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter’i ambalaj üzerinde ve ürün talimatlarında belirtildiği şekilde saklayın.

• 3M Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter’i mutlaka son kullanma tarihinden önce kullanın.

• 3M™ Campylobacter Zenginleştirme Besiyeri’ni ürün talimatlarını izleyerek hazırlayın.

• 3M Campylobacter Zenginleştirme Besiyeri’ni otoklavlamayın.

• 3M Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter’i kurum içinde veya üçüncü bir tarafça onaylanmış gıda ve çevre

numuneleri ile kullanın.

• 3M Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter’i sadece kurum içinde veya üçüncü bir tarafça onaylanmış yüzeyler,

sanitizerler, protokoller ve bakteri suşları ile kullanın.

• Aril sülfonat kompleksiyle birlikte Nötrleştirici Tampon içeren çevresel bir numune için test etmeden önce 1:2 oranında

bir dilüsyon gerçekleştirin (1 ölçek steril zenginleştirme sıvı besiyeri içine 1 ölçek numune). Başka bir seçenek ise

3MLizis Solüsyonu tüplerine 10 µL nötrleştirici tampon zenginleştirme aktarmaktır. Aril sülfonat kompleksli Nötrleştirici

Tampon içeren 3M™ Numune İşleme Ürünleri: BPPFV10NB, RS96010NB, RS9604NB, SSL10NB, SSL10NB2G,

HS10NB, HS10NB2G ve HS2410NB2G.

Kimyasallara ve biyolojik tehlikelere maruz kalma ile ilişkili riskleri azaltmak için:

• Patojen testini doğru donanıma sahip bir laboratuvarda, eğitimli personelin kontrolü altında gerçekleştirin. İnkübe

edilmiş zenginleştirme ortamı ve inkübe edilmiş zenginleştirme ortamıyla temas etmiş ekipman veya yüzeyler, insan

sağlığı için risk oluşturmaya yetecek düzeylerde patojenler içerebilir.

• Reaktier ve kontamine olmuş numuneler ile çalışırken, uygun koruyucu kıyafet ve gözlük kullanımı dahil olmak üzere,

daima standart laboratuvar güvenlik uygulamalarını izleyin.

• Amplikasyon sonrasında zenginleştirme ortamları ve reaktif tüplerinin içeriği ile temastan kaçının.

• Zenginleştirilmiş numuneleri, geçerli yerel/bölgesel/ulusal/düzenleyici standartlara göre imha edin.

• Lizis test aşaması sırasında doğru şekilde ısıl işleme tabi tutulmayan numuneler, olası bir biyolojik tehlike olarak

düşünülebilir ve 3M Moleküler Tayin Cihazı’na YERLEŞTİRİLMEMELİDİR.

Testi hazırlarken çapraz kontaminasyonla ilişkili riskleri azaltmak için:

• Daima eldiven takın (kullanıcıyı korumak ve nükleazların girişini önlemek için).

Sıcak sıvılara maruz kalınmasıyla ilişkili riskleri azaltmak için:

• Isıtıcıdaki önerilen sıcaklık ayarını aşmayın.

• Önerilen ısıtma süresini aşmayın.

• 3M™ Moleküler Tayin Isıtma Bloğu Ek Parçası sıcaklığını doğrulamak için uygun ve kalibre edilmiş bir termometre

kullanın (örneğin tamamen daldırma tipi termometre değil, kısmi daldırma tipi termometre veya dijital sıcaklık sensörlü

termometre). Termometre, 3M Moleküler Tayin Isıtma Bloğu Ek Parçası’nda belirlenmiş olan konuma yerleştirilmelidir.

BİLDİRİM

Testi hazırlarken çapraz kontaminasyonla ilişkili riskleri azaltmak için:

• Reaktif pellet hidrasyonundan önce eldivenleri değiştirin.

• Steril, aerosol bariyerli (ltreli), moleküler biyoloji sınıfı pipet uçlarının kullanılması tavsiye edilir.

• Her numune aktarımı için yeni bir pipet ucu kullanın.

• Numunenin zenginleştirilmiş besiyerinden lizis tüpüne aktarılması için İyi Laboratuvar Uygulamalarını kullanın. Pipeti

kullanacak kişinin kontaminasyona maruz kalmasından kaçınmak için kullanıcı ara bir aktarım adımı eklemeyi seçebilir.

Örneğin kullanıcı zenginleştirilmiş her numuneyi steril bir tüpe aktarabilir.

• Mevcutsa germisidal lamba içeren bir moleküler biyoloji çalışma tezgahı kullanın.

(Türkçe)

TR

168

• Laboratuvar tezgahlarını ve ekipmanını (pipetler, kapak takma/kapak sökme araçları vb.) %1-5’lik (suda v:v) bir çamaşır

suyu çözeltisi veya DNA uzaklaştırma çözeltisi ile periyodik olarak dekontamine edin.

Yanlış pozitif sonuçlarla ilişkili riskleri azaltmak için:

• Amplikasyon sonrasında reaktif tüplerini asla açmayın.

• Kontamine olmuş tüpleri, her zaman %1-5’lik (suda v:v) bir çamaşır suyu solüsyonunda 1 saat süreyle bekleterek ve test

hazırlık alanından uzakta imha edin.

• Amplikasyon sonrasında reaktif tüplerine asla otoklav uygulamayın.

Ek bilgiler ve ürünün imha edilmesi ile ilgili yerel düzenlemeler için Güvenlik Veri Formu’na bakın.

Belirli uygulamalar veya prosedürler hakkında sorularınız varsa www.3M.com/foodsafety adresindeki web sitemizi ziyaret

edin veya yerel 3M temsilcisi ya da distribütörü ile iletişim kurun.

Kullanıcının Sorumluluğu

Kullanıcılar ürün talimatları ve bilgileri hakkında bilgi edinmekle yükümlüdür. Daha fazla bilgi için www.3M.com/foodsafety

adresindeki web sitemizi ziyaret edin veya yerel 3M temsilcinizle ya da dağıtımcınızla iletişime geçin.

Bir test yöntemi seçilirken numune alma yöntemleri, test protokolleri, numunenin hazırlanması, işlem yapılması, laboratuvar

tekniği gibi dış faktörlerin ve numunenin kendisinin sonuçları etkileyebileceğinin bilinmesi gerekir.

Seçilen test yönteminin kullanıcının kriterlerini karşıladığı konusunda kullanıcıyı tatmin edecek uygun matrisler ve

mikrobiyal zorluklarla yeterli sayıda numuneyi değerlendirmek üzere herhangi bir test yönteminin seçilmesi kullanıcının

sorumluluğundadır.

Tüm test yöntemlerinin ve sonuçlarının müşteri ve tedarikçi gereksinimlerini karşılamasını sağlamak yine kullanıcının

sorumluluğundadır.

Tüm test yöntemlerinde olduğu gibi, herhangi bir 3M Gıda Güvenliği ürününün kullanılmasından elde edilen sonuçlar test

edilen matrislerin veya süreçlerin kalitesi konusunda bir garanti oluşturmaz.

Çeşitli gıda matrislerine yönelik olarak yöntemin değerlendirilmesinde müşterilere yardımcı olmak için 3M, 3M™ Moleküler

Tayin Matris Kontrolü kitini geliştirmiştir. Gerektiğinde, matrisin 3M Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter sonuçlarını

etkileyip etkileyemediğini belirlemek üzere 3M Moleküler Tayin Matris Kontrolünü (MC) kullanın. 3M yönteminin adapte

edildiği ya da yeni veya bilinmeyen matrislerin ya da ham maddesi veya prosesi değişen matrislerin test edildiği herhangi bir

validasyon döneminde, matrisi temsil eden birkaç numuneyi, yani farklı kaynaktan alınan numuneleri test edin.

Matris; bileşim ve proses gibi yapısal özellikleri olan bir ürün türü olarak tanımlanabilir. Matrisler arasındaki farklılıklar,

proseslerindeki veya sunumlarındaki farklılıkların neden olduğu etkiler kadar basit olabilir (ör. pastörize ve ham,

kuru ve taze vb.).

Garantilerin Sınırlandırılması/Sınırlı Çözüm

3M, HER BİR ÜRÜN AMBALAJININ ÜZERİNDEKİ SINIRLI GARANTİ KISMINDA AÇIKÇA BELİRTİLENLER HARİCİNDE,

PAZARLANABİLİRLİK VEYA BELİRLİ BİR KULLANIMA UYGUNLUK GARANTİLERİ DAHİL ANCAK BUNLARLA SINIRLI

OLMAMAK ÜZERE HERHANGİ BİR AÇIK VEYA ZIMNİ GARANTİYİ KABUL ETMEMEKTEDİR. Herhangi bir 3M Gıda

Güvenlik Ürünü’nün kusurlu olması durumunda, 3M veya yetkili dağıtımcısı, tercihine göre ürünü değiştirecek veya ürün

satış tutarını iade edecektir. Tarafınıza münhasır çözümler bunlardır. Üründe mevcut olduğundan kuşku duyulan herhangi bir

kusurun fark edilmesinden sonraki altmış gün içinde durumu 3M’e bildirin veya ürünü 3M’e iade edin. Mal İade İzni almak

için lütfen Müşteri Hizmetleri’ni (ABD’de 1-800-328-1671) veya yerel resmî 3M Gıda Güvenliği temsilcinizi arayın.

3M’in Sınırlı Sorumluluğu

3M DOĞRUDAN, DOLAYLI, ÖZEL, ARIZİ VEYA NETİCE KABİLİNDEN DOĞMUŞ, KAYBEDİLMİŞ KAZANÇLAR DAHİL

ANCAK BUNUNLA SINIRLI OLMAMAK ÜZERE HERHANGİ BİR KAYIP VEYA ZARARDAN SORUMLU OLMAYACAKTIR.

Hiçbir durumda 3M’in herhangi bir hukuk kuramı altındaki sorumluluğu, kusurlu olduğu iddia edilen ürünün satış

yatınıaşamaz.

Saklama ve Atma

3M Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter’i 2-8°C’de (35-47°F) saklayın. Dondurmayın. Saklama sırasında kiti ışıktan

uzak tutun. Kiti açtıktan sonra, folyo poşetin zarar görmemiş olduğunu teyit edin. Poşet zarar görmüşse kullanmayın.

Açıldıktan sonra, kullanılmayan reaktif tüplerinin, liyolize reaktierin stabilitesini sürdürmek amacıyla, içinde nem çekici

ile ağzı tekrar kapatılabilir poşet içinde saklanması gerekir. Yeniden kapatılmış poşetleri 90 günden uzun olmamak kaydıyla

2-8°C (35-47°F) sıcaklıkta saklayın.

(Türkçe)

TR

169

Son kullanma tarihi geçen 3M Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter’i kullanmayın. Son kullanma tarihi ve lot numarası

kutunun dış yüzündeki etikette belirtilmiştir. Kullanım sonrasında, zenginleştirme ortamı ve 3M Moleküler Tespit Analizi

2 - Campylobacter tüpleri, potansiyel olarak patojenik materyaller içerebilir. Test tamamlandığında, kontamine atığın

imha edilmesi için geçerli endüstri standartlarına uyun. Ek bilgiler ve ürünün imha edilmesi ile ilgili yerel düzenlemeler için

Güvenlik Veri Formu’na bakın.

Kullanım Talimatları

Tüm talimatlara dikkatle uyun. Bu uyarının dikkate alınmaması hatalı sonuçlara neden olabilir.

Laboratuvar tezgahlarını ve ekipmanını (pipetler, kapak takma/kapak sökme araçları vb.) %1-5’lik (suda v:v) bir çamaşır suyu

çözeltisi veya DNA uzaklaştırma çözeltisi ile periyodik olarak dekontamine edin.

Kullanıcı, “3M Moleküler Tayin Sistemi için Kurulum Yeterliliği (IQ) / Çalışma Yeterliliği (OQ) Protokolleri ve Talimatlar”

belgesinde

(6)

açıklanan şekilde 3M Moleküler Tayin Sistemi operatör yeterliliği (OQ) eğitimini tamamlamalıdır.

Ortam Hazırlama

3M™ Campylobacter Zenginleştirme Besiyeri’ni (CE250) ürün talimatlarını izleyerek hazırlayın. Ortamı kullanmadan önce

otoklavlamayın. Hazırlanan ortamı 24 saat içinde kullanın. Hazırlanan besiyerini 2-8°C’de

(7)

hemen kullanılmayacaksa

ışıktan korunacağı bir yerde saklayın. Kullanmadan önce ortam sıcaklığının 20-30°C olduğundan emin olun.

Numune Toplama

3M Campylobacter Zenginleştirme Besiyeri, kuş yıkama veya taşıma ortamı olarak kullanılmamalıdır. Yerleşik numune

alma prosedürlerinizi izleyerek numuneleri toplayıp taşıyın.

Örnek Zenginleştirme

Tablo 2; gıda ve çevresel numunelere yönelik genel zenginleştirme protokolleri için rehberlik sunar.

Bu test yönteminin kullanıcı kriterlerini karşılamasını sağlamak üzere alternatif numune alma protokollerinin veya dilüsyon

oranlarının valide edilmesi kullanıcının sorumluluğundadır.

Örnek Hazırlama

a. Karkas yıkama ve ham kümes hayvanı parçası yıkama

1. Ham kümes hayvanı karkasının içini boşalttıktan sonra 400 mL tamponlanmış peptonlu su (BPW) ile bir dakika

yıkayın. Ham kümes hayvanı parçaları yıkanıyorsa, 1,8 ila 2 kg (4 lb ± %10) kuş parçalarını 400 mL BPW

(1,8)

ile

yıkayın.

2. Karkas ve ham kümes hayvanı parçalarını yıkarken, numune torbasındaki fazla işleme sıvısını aktarmamak için

numuneyi yıkamadan önce fazla sıvının damlamasını bekleyin

(8)

.

3. Setilpiridinyum klorür (CPC) ile işlenen kümes hayvanları için L başına 5 mL Polysorbate 80’in (IUPAC:Polioksietilen

(20) sorbitan monooleat; CAS 9005-65-6) hazırlanmış 3M Campylobacter Zenginleştirme Besiyeri’ne

eklenmesi gerekir. Polysorbate 80, çözünmeyi kolaylaştırmak için sterilizasyon öncesinde suya eklenebilir veya

3MCampylobacter Zenginleştirme Besiyeri hazırlanmadan önce doğrudan steril suya eklenebilir.

4. 30 mL durulama suyunu steril bir torbaya aseptik olarak aktarın ve 30 mL 3M Campylobacter Zenginleştirme

Besiyeri ekleyin.

b. Karkas spanç

1. Spançlar numune alınmadan önce 25 mL’ye kadar BPW ile nemlendirilmelidir

(1)

. Numuneler aktarılıyorsa torbanın

sarılıp 2-8°C’de saklandığından emin olun.

2. Kümes hayvanı karkasından svab veya spanç ile numune alın.

3. Svabı steril bir torbaya yerleştirin ve 25 mL 3M Campylobacter Zenginleştirme Besiyeri ekleyin. Svab veya spancın

zenginleştirme ortamı ile kaplandığından emin olun.

c. Ham kümes hayvanı ürünleri

1. Numuneden aseptik olarak 325 ± 32,5 g tartın ve numuneyi steril bir torbaya yerleştirin. Ham kümes hayvanı

ürününe 1625 ± 32,5 mL BPW ekleyin. Parçaları dağıtmak için, elinizde masaj yaparak iyice karıştırın.

2. Karıştırdıktan sonra 30 mL ham kümes hayvanı karışımını steril bir torbaya koyun ve sonra 30 mL

3MCampylobacter Zenginleştirme Besiyeri ekleyin ve iyice karıştırın.

d. Ham ve yemeye hazır et

1. Numuneden aseptik olarak 25 g tartın ve numuneyi steril bir torbaya yerleştirin. Numune almayı kolaylaştırmak için

ltre torbası önerilir.

2. 225 mL 3M Campylobacter Zenginleştirme Besiyeri ekleyin.

(Türkçe)

TR

170

3. Parçaları bölmek için elinizle masaj yapın, karıştırırken kabarcık oluşmasını önleyin. Torbayı sindirme veya

harmanlama işlemlerinden geçirmeyin.

e. Birincil üretim botu svabları

1. Yerleşik numune toplama prosedürlerinizi izleyerek, bot svabları veya şosetleri ile numuneyi toplayın.

2. BİR şoseti steril bir torbaya yerleştirin ve 100 mL 3M Campylobacter Zenginleştirme Besiyeri ekleyin.

f. Sürükleme svabı

1. Yerleşik numune toplama prosedürlerinizi izleyerek, önceden ıslatılmış svab cihazı ile numuneyi toplayın.

2. Svabı steril bir torbaya yerleştirin ve 100 mL 3M Campylobacter Zenginleştirme Besiyeri ekleyin.

Zenginleştirme İnkübasyonu

1. Tepe boşluğunu azaltmak ve zenginleştirmenin havaya maruz kalmasını önlemek için torbayı sarın. Yaklaşık

10±2saniye boyunca torbaya hafçe masaj yapın. Torbayı sindirme veya harmanlama işlemlerinden geçirmeyin

vekarıştırma sırasında kabarcık oluşumunu önleyin.

2. Torbayı 41,5 ± 1°C’de aerobik olarak inkübe edin; uygun inkübasyon süresi için tablo 2’ye bakın.

UYARI: Spanç için hidratlayıcı çözelti olarak aril sülfonat içeren nötralizasyon tamponu kullanmayı seçtiyseniz, kontamine

ürünün açığa çıkmasına yol açan yanlış negatif bir sonuçla ilişkili riskleri azaltmak amacıyla, test öncesi zenginleştirilmiş

çevresel numune için 1:2 oranında dilüsyon (1 ölçek steril zenginleştirme ortamı içine 1 ölçek numune) gerçekleştirilmesi

gereklidir. Başka bir seçenek ise 3M Lizis Solüsyonu tüplerine 10 µL Nötrleştirici Tampon zenginleştirme aktarmaktır.

Bu test yönteminin kullanıcı kriterlerini karşılamasını sağlamak üzere alternatif numune alma protokollerinin veya dilüsyon

oranlarının valide edilmesi kullanıcının sorumluluğundadır.

Tablo 2. Genel Zenginleştirme Protokolleri.

Numune Matrisi Numune Boyutu 3M Campylobacter

Zenginleştirme

Besiyeri (mL)

(b)

Zenginleştirme

Sıcaklığı (± 1°C)

Zenginleştirme

Süresi (saat)

Numune

Analiz

Hacmi (µL)

(c)

• Karkas yıkama

(a)

• Kuş parçası

yıkama

(a)

BPW’de 30 mL

rinsat

30 41,5 22-26 20

• Karkas spanç

(a)

25 mL BPW

ile önceden

nemlendirilmiş

1spanç

25 41,5 22-26 20

• Ham et

• Yemeye hazır et

25 g 225 41,5 24-28 20

• Birincil üretimden

bot svabları

1 bot svabı 100 41,5 22-26 20

• Birincil üretimden

sürükleme svabları

1 önceden

nemlendirilmiş

cihaz

100 41,5 22-26 20

(a) Kuşlar Setilpiridinyum klorür (CPC) ile işlenmişse, L başına 5 mL Polysorbate 80’in (IUPAC: Polioksietilen (20)

sorbitan monooleat; CAS 9005-65-6) hazırlanmış 3M Campylobacter Zenginleştirme Besiyeri’ne eklenmesi

gerekir. Polysorbate 80, sterilizasyon öncesinde suya eklenebilir veya 3M Campylobacter Zenginleştirme Besiyeri

hazırlanmadan önce steril suya eklenebilir.

(b) 3M Campylobacter Zenginleştirme Besiyeri hazırlandıktan sonraki 24 saat içinde kullanılmalıdır. Ortam kullanılmadan

önce oda sıcaklığına (25-30°C) ulaşmalıdır.

(c) Analiz için zenginleştirme numunesi toplanmadan önce, torbanın altına hafçe masaj yapın. Numune alındıktan sonra,

zenginleştirmenin havaya maruz kalmasını önlemek için torbayı sarın. Yeniden test veya doğrulama adımları için ek

numune gerekebilir.

(Türkçe)

TR

171

Valide Edilmiş Yöntemler İçin Özel Talimatlar

AOAC® Performance Tested

SM

(PTM) Certicate #111803

AOAC Research Institute PTM

SM

çalışmalarında, 3M Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter’in Campylobacter

tespitinde etkili bir yöntem olduğu bulunmuştur. Çalışmada test edilen matrisler Tablo 3’te gösterilmiştir.

Tablo 3. AOAC PTM

SM

Certicate #111803’e Göre Zenginleştirme Protokolleri.

Numune Matrisi Numune Boyutu 3M

Campylobacter

Zenginleştirme

Besiyeri (mL)

(c)

Zenginleştirme

Sıcaklığı (± 1°C)

Zenginleştirme

Süresi (saat)

Numune

Analiz

Hacmi (µL)

(d)

400 mL BPW’de

yıkanan bütün

karkas

(a) (b)

BPW’de 30 mL rinsat 30 41,5 22-26 20

400 mL BPW’de

yıkanan kuş parçası

(1,8-2 kg)

(a) (b)

BPW’de 30 mL rinsat 30 41,5 22-26 20

Hindi karkas

spancı

(a) (b)

25 mL BPW ile önceden

nemlendirilmiş 1 spanç

25 41,5 24-26 20

1625 ± 32,5 mL

BPW’de yıkanmış ham

kümes hayvanları

(325 ± 32,5 g)

(b)

BPW’de 30 mL ürün

karışımı

30 41,5 24-28 20

Tavuk parçaları 25 g 225 41,5 24-28 20

(a) Kuşlar Setilpiridinyum klorür (CPC) ile işlenmişse, L başına 5 mL Polysorbate 80’in (IUPAC: Polioksietilen (20)

sorbitan monooleat; CAS 9005-65-6) hazırlanmış 3M Campylobacter Zenginleştirme Besiyeri’ne eklenmesi

gerekir. Polysorbate 80, sterilizasyon öncesinde suya eklenebilir veya 3M Campylobacter Zenginleştirme Besiyeri

hazırlanmadan önce steril suya eklenebilir.

(b) Alternatif olarak bu matris, mikroaerobik koşullarda 42 ± 1,0°C’de 48 ± 2 saat boyunca 30 mL 2X kansız Bolton

Zenginleştirme Besiyeri (BF-BEB) ile zenginleştirilebilir. 3M Lizis Solüsyonuna 20 µL numune aktarın.

(c) 3M Campylobacter Zenginleştirme Besiyeri hazırlandıktan sonraki 24 saat içinde kullanılmalıdır. Ortam kullanılmadan

önce oda sıcaklığına (25-30°C) ulaşmalıdır.

(d) Analiz için zenginleştirme numunesi toplanmadan önce, torbanın altına hafçe masaj yapın. Numune alındıktan sonra,

zenginleştirmenin havaya maruz kalmasını önlemek için torbayı sarın. Yeniden test veya doğrulama adımları için ek

numune gerekebilir.

3M™ Moleküler Tayin Hızlı Yükleyici Tepsisi’nin Hazırlanması

1. Bir bezi veya tek kullanımlık havluyu %1-5 (suda v:v) çamaşır suyu çözeltisiyle ıslatın ve 3M Moleküler Tayin Hızlı

Yükleyici Tepsisi’ni silin.

2. 3M Moleküler Tayin Hızlı Yükleyici Tepsisi’ni su ile durulayın.

3. 3M Moleküler Tayin Hızlı Yükleyici Tepsisi’ni silmek için tek kullanımlık bir havlu kullanın.

4. Kullanmadan önce, 3M Moleküler Tayin Hızlı Yükleyici Tepsisi’nin kuru olduğundan emin olun.

3M™ Moleküler Tayin Soğutma Bloğu Ek Parçası’nın Hazırlanması

3M Moleküler Tayin Soğutma Bloğu Ek Parçası’nı doğrudan laboratuvar tezgahına yerleştirin: 3M Moleküler Tayin Soğutma

Bloğu Tepsisi kullanılmaz. Bloğu laboratuvar ortam sıcaklığında kullanın (20-25°C).

3M™ Moleküler Tayin Isıtma Bloğu Ek Parçası’nın Hazırlanması

3M Moleküler Tayin Isıtma Bloğu Ek Parçası’nı kuru, çift bloklu bir ısıtma ünitesine yerleştirin. Kuru blok ısıtıcı ünitesini

çalıştırın ve 3M Moleküler Tayin Isıtma Bloğu Ek Parçası’nın 100 ± 1°C’lik bir sıcaklığa ulaşmasını ve bu sıcaklığı korumasını

sağlamak için sıcaklığı ayarlayın.

(Türkçe)

TR

172

NOT: Isıtma ünitesine bağlı olarak, 3M Moleküler Tayin Isıtma Bloğu Ek Parçası'nın istenen sıcaklığa ulaşması için

yaklaşık 30 dakika bekleyin. Belirlenen yere yerleştirilmiş uygun, kalibre edilmiş bir termometre (ör. tamamen daldırmalı

termometre değil, kısmi daldırmalı termometre veya dijital sıcaklık sensörlü termometre) kullanarak 3M Moleküler Tayin

Isıtma Bloğu Ek Parçası'nın 100 ± 1°C'de olduğunu doğrulayın.

3M™ Moleküler Tayin Cihazı’nın Hazırlanması

1. 3M™ Moleküler Tayin Yazılımı’nı başlatın ve giriş yapın. Yazılımın en güncel sürümüne sahip olduğunuzdan emin olmak

için 3M Food Safety temsilcisiyle temas kurun.

2. 3M Moleküler Tayin Cihazı’nı çalıştırın.

3. Her bir numunenin verisiyle bir test oluşturun veya düzenleyin. Ayrıntılar için bkz. 3M Moleküler Tayin Sistemi Kullanım

Kılavuzu.

NOT: Reaksiyon tüpleri ile birlikte 3M Moleküler Tayin Hızlı Yükleyici Tepsisi yerleştirilmeden önce, 3M Moleküler Tayin

Cihazı Hazır duruma gelmelidir. Bu ısınma aşaması yaklaşık 20 dakika sürer ve cihazın durum çubuğunda TURUNCU bir

ışıkla gösterilir. Cihaz bir testi başlatmaya hazır olduğunda, durum çubuğu YEŞİL renge döner.

Lizis

3M Lizis Solüsyonu Rafının alt kısmını 3M Moleküler Tayin Isıtma Bloğu Ek Parçası’na yerleştirmeden önce tornavida

ilesökün.

1. Rafı bir gece boyunca (16-18 saat) ortam sıcaklığına (20-25°C) ayarlayarak 3M Lizis Solüsyonu tüplerinin ısınmasını

sağlayın. 3M Lizis Solüsyonu tüplerini ortam sıcaklığına getirmek için alternatier, 3M Lizis Solüsyonu tüplerini en az

2 saat laboratuvar tezgahına koymak, 3M Lizis Solüsyonu tüplerini 1 saat boyunca 37 ± 1°C’de inkübe etmek veya kuru

çift bloklu bir ısıtıcıya 100°C’de 30 saniyeliğine yerleştirmektir.

2. Karıştırmak için kapaklı tüpleri ters çevirin. Ters çevirdikten sonraki 4 saat içinde sıradaki adıma geçin.

3. Zenginleştirilmiş numuneyi inkübatörden çıkarın.

3.1.1 Numuneyi 3M Lizis Solüsyonu tüpüne aktarmadan önce zenginleştirme torbasının altına hafçe masaj yapın.

3.1.2 Yeniden test veya doğrulama adımları için ek numune gerekebilir. Numuneyi aldıktan sonra tepe boşluğunu

azaltmak ve zenginleştirmenin havaya maruz kalmasını önlemek için torbayı sarın. Varsayıma dayalı

sonuçların doğrulanması gerekirse, varsayıma dayalı sonuç alındıktan hemen sonra doğrulama adımlarına

geçin.

4. Her numune ve NC numunesi (steril zenginleştirme ortamı) için bir 3M Lizis Solüsyonu tüpü gereklidir.

4.1 3M Lizis Solüsyonu tüp şeritleri, istenilen tüp sayısı kadar kesilebilir. İhtiyaç duyulan sayıda tüp veya 8 tüplük

şeritler seçin. 3M Lizis Solüsyonu tüplerini boş bir rafa koyun.

4.2 Çapraz kontaminasyonu önlemek için 3M Lizis Solüsyonu tüp şeridi kapaklarını teker teker açın ve her aktarım

aşaması için yeni bir pipet ucu kullanın.

4.3 Aşağıda açıklandığı gibi, zenginleştirilmiş numuneyi 3M Lizis Solüsyonu tüplerine aktarın:

İlk olarak, her bir zenginleştirilmiş numuneyi ayrı bir 3M Lizis Solüsyonu tüpüne aktarın. Son olarak NC'yi aktarın.

4.4 Tek seferde bir şerit üzerinde çalışarak, 3M Lizis Solüsyonu tüp şeridinin kapağını sökmek için 3M™ Moleküler

Tayin Kapak Takma / Kapak Sökme Aracı - Lizis’i kullanın.

4.5 3M Lizis Solüsyonu tüp kapağını atın - Lizat tekrar test edilmek üzere tutulacaksa lizisten sonra tekrar uygulama için

kapakları temiz bir kaba koyun.

4.5.1 Elde bulunan lizatın işlenmesi için Ek A’ya bakın.

4.6 3M Lizis Solüsyonu tüpüne 20 µL numune aktarın.

(Türkçe)

TR

173

5. Test edilecek numune sayısı için 4.4 ila 4.6 adımlarını gerektiği şekilde tekrar edin.

20 µl

6. Tüm numuneler aktarıldığında, 20 µL kadar NC’yi (BPW gibi steril zenginleştirme ortamı) 3M Lizis Solüsyonu tüpüne

aktarın. NC olarak su kullanmayın.

7. 3M Moleküler Tayin Isıtma Bloğu Ek Parçası sıcaklığının 100 ± 1°C’de olduğunu doğrulayın.

8. Üstü açık 3M Lizis Solüsyonu tüpleri rafını 3M Moleküler Tayin Isıtma Bloğu Ek Parçası’na yerleştirin ve 15 ± 1 dakika

boyunca ısıtın. Isıtma boyunca, 3M Lizis Solüsyonunun rengi pembeden (soğuk) sarıya (sıcak) dönecektir.

8.1 Lizis test aşaması sırasında doğru şekilde ısıl işleme tabi tutulmayan numuneler, olası bir biyolojik tehlike olarak

düşünülebilir ve 3M Moleküler Tayin Cihazı’na YERLEŞTİRİLMEMELİDİR.

9. 3M Lizis Solüsyonu tüplerinin açık rafını 3M Moleküler Tayin Isıtma Bloğundan çıkarın ve 3M Moleküler Tayin Soğutma

Bloğu Ek Parçası’nda en az 5, en fazla 10 dakika soğumasını bekleyin. 3M™ Moleküler Tayin Soğutma Bloğu Tepsisi

olmadan oda sıcaklığında kullanılan 3M Moleküler Tayin Soğutma Bloğu Ek Parçası, laboratuvar tezgahına doğrudan

yerleştirilmelidir. Soğuduğunda, 3M Lizis Solüsyonunun rengi tekrar pembeye dönecektir.

10. 3M Lizis Solüsyonu tüp rafını 3M Moleküler Tayin Soğutma Bloğu Ek Parçası’ndan çıkarın.

00:15:00

99-101ºC

20-25ºC

00:05:00

Amplikasyon

1. Her bir numune ve NC için bir 3M Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter Reaktif Tüpü gereklidir.

1.1 Tüp şeritleri istenilen tüp sayısı kadar kesilebilir. 3M Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter Reaktif Tüpünün

veya gereken 8’li tüp şeritlerinin sayısını seçin.

1.2 Tüpleri boş bir raf içine yerleştirin.

1.3 Tüplerin dip tarafındaki reaktif pelletlerini karıştırmaktan kaçının.

2. Bir adet 3M Reaktif Kontrolü Tüpü seçin ve rafa yerleştirin.

3. Çapraz kontaminasyonu önlemek için tek seferde yalnızca bir 3M Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter Reaktif

Tüpü şerit kapağını açın ve her aktarım aşaması için yeni bir pipet ucu kullanın.

4. Lizatların her birini 3M Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter Reaktif Tüpü ile 3M Reaktif Kontrolü Tüpüne aşağıda

açıklanan şekilde aktarın:

Her bir numune lizatını önce bir 3M Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter Reaktif Tüpüne, ardından NC’ye aktarın.

3M Reaktif Kontrolü Tüpünü en son hidratlayın.

5. 3M™ Moleküler Tayin Kapak Takma / Kapak Sökme Aracı - Reaktif’i kullanarak, 3M Moleküler Tespit Analizi 2 -

Campylobacter Reaktif Tüplerinin kapağını, tek seferde tek tüp şeridi olacak şekilde çıkarın. Kapağı atın.

5.1 20 µL lizat numunesini, 3M Lizis Solüsyonu tüpündeki sıvının ½’lik üst kısmından (çökeltiyi önleyerek) ilgili

3MMoleküler Tespit Analizi 2 -

Campylobacter

Reaktif Tüpüne aktarın. Pelletlerin karışmasını önlemek için açılı

olarak dökün. Yukarı ve aşağı 5 kez pipetleyerek nazikçe karıştırın.

5.2 Şeritte karşılık gelen 3M Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter Reaktif Tüpüne tek lizat numunesi eklenene

kadar adım 5.1’i tekrarlayın.

5.3 3M Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter Reaktif Tüplerini, tedarik edilen ilave kapaklar ile kapatın ve kapağın

sıkı bir şekilde kapatıldığından emin olmak amacıyla, ileri geri hareketle basınç uygulamak üzere 3M Moleküler

Tayin Kapak Takma / Kapak Sökme Aracı - Reaktif’inin yuvarlak tarafını kullanın.

5.4 Test edilecek numune sayısı için 5.1 ila 5.3 adımlarını gerektiği şekilde tekrar edin.

5.5 Tüm lizat numuneleri aktarıldığında, adım 5.1 ila 5.3’ü tekrarlayarak 20 µL NC lizatı bir 3M Moleküler Tespit Analizi

2 - Campylobacter Reaktif Tüpüne aktarın.

(Türkçe)

TR

174

5.6 20 µL NC lizatı bir 3M Reaktif Kontrolü Tüpüne aktarın. Pelletlerin karışmasını önlemek için açılı olarak dökün.

Yukarı ve aşağı 5 kez pipetleyerek nazikçe karıştırın.

6. Kapağı takılmış olan tüpleri temiz ve dekontamine edilmiş bir 3M Moleküler Tayin Hızlı Yükleyici Tepsisi’ne yükleyin.

3MMoleküler Tayin Hızlı Yükleyici Tepsisi kapağını kapatın ve mandalını kilitleyin.

20 µL

7. 3M Moleküler Tayin Yazılımı’nda yapılandırılmış testi gözden geçirin ve onaylayın.

8. Yazılımdaki Start (Başlat) düğmesine tıklayın ve kullanılacak cihazı seçin. Seçilen cihazın kapağı otomatik olarak açılır.

9. 3M Moleküler Tayin Hızlı Yükleyici Tepsisi’ni 3M Moleküler Tayin Cihazı’na yerleştirin ve testi başlatmak üzere kapağı

kapatın. Pozitif sonuçlar daha önce tespit edilebilmekle beraber, sonuçlar 60 dakika içinde elde edilir.

10. Test tamamlandıktan sonra, 3M Moleküler Tayin Hızlı Yükleyici Tepsisi’ni 3M Moleküler Tayin Cihazı’ndan çıkarın ve

tüpleri 1 saat boyunca %1-5’lik (suda v:v) çamaşır suyu çözeltisine daldırarak test hazırlık alanından uzakta imha edin.

BİLDİRİM: Çapraz kontaminasyondan kaynaklanan yanlış pozitif sonuçların elde edilmesi riskini en aza indirmek

için ampliye edilmiş DNA'yı içeren reaktif tüplerini hiçbir zaman açmayın. Buna 3M Moleküler Tespit Analizi 2 -

Campylobacter Reaktif, 3M Reaktif Kontrolü ve 3M Matris Kontrol Tüpleri dahildir. Ağzı sızdırmaz bir şekilde kapatılmış

reaktif tüplerini, her zaman %1-5'lik (suda v:v) bir çamaşır suyu çözeltisinde 1 saat süreyle bekleterek ve test hazırlık

alanından uzakta imha edin.

Sonuçlar ve Yorumlama

Bir algoritma, nükleik asit amplikasyonu tayininden kaynaklanan ışık çıkışı eğrisini yorumlar. Sonuçlar yazılım tarafından

otomatik olarak analiz edilir ve sonuca göre renk kodlamasına tabi tutulur. Benzersiz eğri parametreleri sayısı analiz edilerek

Pozitif veya Negatif bir sonuç belirlenir. Negatif sonuçlar ve Kontrol sonuçları test tamamlandıktan sonra gösterilirken, olası

Pozitif sonuçlar gerçek zamanlı olarak bildirilir.

Olası pozitif numuneler, birincil 3M Campylobacter Zenginleştirme Besiyeri ile zenginleştirmeden mikroaerolik inkübasyon

ile seçici Campylobacter plaklarına aktarım, uygun biyokimyasal, mikroskopik ve serolojik yöntemler kullanılarak izolatların

onaylanması gibi işlemlerle başlayarak standart laboratuvar prosedürlerine veya uygun referans doğrulama yöntemine

(1,2)

uygun şekilde doğrulanmalıdır. Zenginleştirmenin en iyi şekilde korunması için numune aldıktan sonra zenginleştirme

torbasını sarın.

NOT: Sistem ve 3M Moleküler Tespit Analizi 2 - Campylobacter amplikasyon reaktieri bir "arka plan" bağıl ışık birimine

(RLU) sahip olduğu için negatif bir numune bile sıfır okuma sonucu vermeyecektir.

Nadir olarak olağan dışı ışık çıkışı durumunda, algoritma bu durumu Kontrol olarak etiketler. 3M, tüm Kontrol numuneleri

için kullanıcının testi tekrarlamasını önerir. Kontrol sonucu almaya devam ederseniz tercih ettiğiniz yöntemi kullanarak veya

yerel düzenlemeler ile belirlendiği şekilde, doğrulama testine geçin

(1,2)

.

Ek A. Protokol Kesintisi: Isıl işlem görmüş lizatların saklanması ve yeniden test edilmesi

1. Isıl işlem görmüş lizatı saklamak için, 3M Lizis Solüsyonu Tüpünü temiz bir kapakla kapatın (bkz. Lizis bölümü, 4.5).

2. 72 saate kadar 2-8°C sıcaklıkta saklayın.

3. Saklanan numuneyi, karıştırmak üzere 2-3 kez ters yüz ederek amplikasyon için hazırlayın.

4. Tüplerin kapaklarını çıkarın.

5. Karıştırılan lizat tüplerini 3M Moleküler Tayin Isıtma Bloğu Ek Parçası üzerine yerleştirin ve 5 ± 1 dakika 100 ± 1°C’de

ısıtın.

6. 3M Lizis Solüsyonu tüplerinin rafını 3M Moleküler Tayin Isıtma Bloğundan çıkarın ve 3M Moleküler Tayin Soğutma

Bloğu Ek Parçası’nda en az 5, en fazla 10 dakika soğumasını bekleyin.

7. Protokole, yukarıda detayları verilen Amplikasyon bölümünden devam edin.

(Türkçe)

TR

Sayfa yükleniyor ...

3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter MDA2CAM96, 96 tests, 1 ea Kullanma talimatları

3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter MDA2CAM96, 96 tests, 1 ea Kullanma talimatları

Diğer dillerde

İlgili Makaleler

Diğer Belgeler